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大鼠CCA端端吻合在神經(jīng)外科顯微技術(shù)初學(xué)者訓(xùn)練中的價值

2019-04-26 14:20 作者:三博腦科醫(yī)院

胡業(yè)帥 錢海 劉方軍 石祥恩

【摘要】目的 探討大鼠頸總動脈(CCA)端端吻合在初學(xué)者顯微技術(shù)訓(xùn)練中的價值。方法 隨機選取來自全國不同地區(qū)神經(jīng)外科醫(yī)生,且未進行過專門顯微技術(shù)訓(xùn)練的初學(xué)者53名作為研究對象,同時隨機選取健康雄性SD大鼠116只,分別行頸總動脈端端吻合術(shù),并在吻合完成后檢查即時血管通暢情況、吻合時間(自放置阻斷夾至松開阻斷夾)、吻合針數(shù),并在24小時后檢查次日血管通暢情況及存活率。結(jié)果:116只SD大鼠中,麻醉致死率約為6.0%(7/116),大出血致死率約為4.3%(5/116),最終有效研究對象104例,平均縫合6.32針,平均用時64.82min,即時血管通暢率85.6%(89/104),次日血管通暢率50.0%(52/104),術(shù)后次日大鼠存活率100%(104/104)。結(jié)論 大鼠頸總動脈端端吻合術(shù)后的即時、次日血管通暢率均較高,術(shù)后存活率高,可以作為未進行過專門顯微技術(shù)訓(xùn)練的神經(jīng)外科初學(xué)者顯微技術(shù)訓(xùn)練的一種較好的動物模型。

【關(guān)鍵詞】

頸總動脈,端端吻合,顯微技術(shù)訓(xùn)練, SD大鼠,初學(xué)者

顯微神經(jīng)外科技術(shù)在現(xiàn)代神經(jīng)外科領(lǐng)域有著至關(guān)重要的作用,不但廣泛應(yīng)用于腦血管搭橋術(shù)中,甚至在腦腫瘤等疾病的治療中也有著非常重要的作用,而學(xué)習(xí)顯微神經(jīng)外科血管吻合技術(shù)通常需要一段時間的實驗室訓(xùn)練與活體動物模型訓(xùn)練。

由于非血管類材料缺乏自體凝血功能,無法模擬正常人體的血栓形成等病理過程,因此大鼠等活體動物是目前最理想的實驗室練習(xí)材料。而頸總動脈端端吻合是最簡單的訓(xùn)練方式,但目前文獻中,對較大范圍內(nèi)的初學(xué)者進行大鼠頸總動脈端端吻合訓(xùn)練研究尚未見報道,我們進行了相關(guān)研究,并取得了滿意效果。現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1)材料

實驗材料隨機選取成年雄性SD大鼠116只,體重220g-250g,體健,且均帶有身體健康證明及檢疫合格證明。購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司。

隨機選取來自全國不同地區(qū)神經(jīng)外科專業(yè)醫(yī)生,并參加我院顯微技術(shù)訓(xùn)練培訓(xùn)班的初學(xué)者53人作為研究對象。平均年齡(38.89±4.25)歲;從事神經(jīng)外科年限(14.11±6.31)年;醫(yī)學(xué)職稱以主治醫(yī)師及副主任醫(yī)師為主,住院醫(yī)師及主任醫(yī)師為輔;地域分布以西北地區(qū)較少,其余地域較為平均;醫(yī)院級別以地市級三甲醫(yī)院為主,二甲及三乙醫(yī)院為輔。在進行頸總動脈端端吻合前,均進行了紗布、膠皮、樹葉等5天基礎(chǔ)性的系統(tǒng)訓(xùn)練,但所有人既往均未參加過顯微培訓(xùn),均未進行過血管、神經(jīng)吻合等顯微操作經(jīng)歷。

2)方法

(1)大鼠麻醉:

采用腹腔注射法,麻醉藥物選用10%水合氯醛,購自北京雷根生物技術(shù)有限公司。左手戴帆布手套,食指與中指抓住大鼠頸后部皮膚,其余三指與手掌抓住大鼠背部皮膚,使其腹部朝上。右手取2ml一次性使用注射器,抽取10%水合氯醛1ml與0.9%的生理鹽水1ml混勻后,自大鼠右下腹部朝向左上腹穿刺,有落空感后,回抽無血后,即可進行腹腔注射。注射完畢后將大鼠放回單獨的鼠籠中,待其麻醉滿意。大約5分鐘,即可取得較滿意的麻醉效果。由于大鼠體質(zhì)原因,有時術(shù)前或術(shù)中麻醉不夠滿意時,可臨時追加0.2ml水合氯醛,追加藥物時,至少間隔15分鐘,每次不可超量,盡可能防止麻醉意外致死。麻醉過程中,要防止被大鼠咬傷。麻醉滿意的標(biāo)志是將大鼠置于仰臥位時,大鼠不會出現(xiàn)四肢活動或抬頭,且呼吸平穩(wěn)。若呼吸淺快有力,則表明麻醉不夠,需再觀察一段時間后,再行追加藥物;若呼吸深慢微弱,則表明麻醉過深,需立即用0.9%的生理鹽水進行腹腔注射,稀釋麻藥。

(2)血管顯露

大鼠麻醉滿意后,置于木板上,用1#縫線固定,頸前部皮膚備皮。自下頜頦隆凸至胸骨上切跡縱行切開皮膚,自中線銳性分離皮下組織及下頜下腺,向兩側(cè)牽拉后,可見縱行分布的頸前肌肉群,其右側(cè)可見內(nèi)下外上走形的胸鎖乳突肌、內(nèi)上外下走形的肩胛舌骨肌,將后兩條肌肉分別向外下、外傷牽拉,可見其內(nèi)側(cè)搏動明顯。鏡下(10倍-16倍)向深處探查分離后,即可見右側(cè)頸總動脈及迷走神經(jīng),仔細游離頸總動脈,盡可能避免損傷頸總動脈周圍交感神經(jīng)叢、迷走神經(jīng)及周圍小血管,血管下放置膠皮墊片,血管阻斷夾夾閉頸總動脈兩端,顯微剪刀間斷頸總動脈,亞甲藍染色血管端端,肝素鹽水沖洗血管斷端殘腔,將兩側(cè)血管斷端向中間牽拉至無張力后,血管模型制作完成。

(3)血管端端吻合

右手持顯微彎鑷夾持11-0顯微縫針,采用“兩點定位法”,在血管兩側(cè)180°(即3點和9點)處分別縫合1針??p合時,先自血管近端外壁垂直血管壁進針,由血管遠端內(nèi)壁垂直血管壁穿出,緣距約為縫針自身厚度的2倍,縫合完畢后打3個結(jié)固定、剪線。采用同樣的方法,分別于血管表面及背面縫合2-3針,盡可能使針距相等??p合完成后,仔細查看吻合口,如有凸起、漏洞、內(nèi)翻明顯,則重新修理縫合。如整齊等距,則吻合完成,總共縫合約6-8針。首先松開血管遠端阻斷夾,若遠端充盈良好,若無明顯滲血,則松開血管近端阻斷夾,若輕微滲血,則用棉球輕壓即可,若干滲血明顯,則需檢查是否需要補針,直至血管通暢,切勿滲血為止。盡量不用棉球用力壓迫血管,防止血栓形成。

QQ截圖20190426141724.png

4)評價方法

采用雙阻斷實驗法檢驗血管通暢與否,具體操作如下:右手持彎鑷夾閉血管吻合口遠端管腔,左手持直鑷在彎鑷遠端夾閉管腔,之后向遠端滑行,將管腔內(nèi)血液擠走,最后松開右手彎鑷。如管腔充盈迅速,則吻合口通暢,端端吻合成功;如管腔充盈緩慢,則吻合口狹窄,需拆除1-2針,重新縫合;如有管腔不能充盈,則吻合口閉塞,血栓形成,需拆除部分縫針,重新縫合。本實驗中吻合口狹窄及閉塞均定為不通暢。

2 結(jié)果

116只SD大鼠中,術(shù)前麻醉死亡率約為6.0%(7/116),術(shù)中出血死亡率約為4.3%(5/116),最終有效研究對象104例,平均縫合6.32針,平均用時64.82min(自剪開血管至松開阻斷夾),即時通暢率85.6%(89/104),次日通暢率50.0%(52/104),術(shù)后次日大鼠存活率100%(104/104)。

3 討論

顱外顱內(nèi)血管搭橋術(shù)早在1951年就已被Fisher提出作為增加腦供血的治療理論。而Yasargil在1970年成功進行的世界首例顳淺動脈-大腦中動脈搭橋術(shù),將顱外顱內(nèi)搭橋術(shù)推向了一個新的時代。盡管后來對實施搭橋技術(shù)的質(zhì)疑聲從未停止,但對神經(jīng)外科醫(yī)師來講,掌握顯微血管搭橋技術(shù)是腦血管外科的一項重要技能,其在腦缺血、腦動脈瘤甚至腦腫瘤等疾病的治療中具有非常重要的作用。

目前顯微血管吻合訓(xùn)練中,更為推崇的是大鼠等模型類真血管活體動物。由于能很好的模擬人類正常血管功能,能提供實時的血液動力學(xué)及血凝生理學(xué)功能,如術(shù)后血管狹窄、血栓形成、血管閉塞等,是目前最合適的訓(xùn)練材料,尤其是SD大鼠。該大鼠是1925年由Wistar大鼠培育而成,特點:頭部狹長,尾長接近于身長,產(chǎn)仔多,生長發(fā)育較Wistar快,而且比Wistar大鼠的適應(yīng)性和抗病能力更強,對于研究血管吻合后的長期隨訪,SD大鼠有更多的優(yōu)勢。本研究即選擇成年SD大鼠為研究對象。

SD大鼠的頸總動脈直徑0.8-1.0mm,與人類的顳淺動脈分支粗細相近,因而被廣泛應(yīng)用于煙霧病顳淺動脈-的大腦中動脈搭橋的動物練習(xí)中。其練習(xí)模型包括:頸總動脈端端吻合、端側(cè)吻合,腹主動脈的端端吻合,雙側(cè)髂動脈的端側(cè)吻合,尾動脈的端端吻合、股動脈的端端吻合等。其中頸總動脈端端吻合是最基礎(chǔ)的練習(xí)模型,其粗細適中,與人體血管管徑相當(dāng)。本實驗結(jié)果顯示:吻合血管的即時通暢率為85.6%,次日通暢率為50.0%。由此可見,在掌握了基本縫合方法后,初學(xué)者也可以行血管端端吻合訓(xùn)練,且即時和次日通暢率較為滿意。

而小鼠也可用于端端吻合練習(xí),但CCA直徑太細,無法進行練習(xí),而腹主動脈可以進行端端吻合,也可行腹主動脈、下腔靜脈側(cè)側(cè)吻合練習(xí),但小鼠容易死亡,包括大出血、麻醉、腸梗阻等,因而不適合初學(xué)者的顯微練習(xí)。也有文獻報道應(yīng)用家兔練習(xí)端端吻合,但利用CCA不合適,因為直徑太粗,起不到練習(xí)效果,尚可以采用耳緣動脈等練習(xí),但購買、飼養(yǎng)成本較高,不能滿足初學(xué)者的聯(lián)系要求。因而大鼠是目前更為合適的練習(xí)標(biāo)本。

另外,本實驗結(jié)果顯示:盡管次日吻合血管通暢率為50%,但104只大鼠次日存活率為100%,可見即便單側(cè)頸總動脈端端吻合失敗,導(dǎo)致單側(cè)CCA閉塞,大鼠也會因?qū)?cè)CCA或后循環(huán)代償供血而長期存活。因而大鼠頸總動脈也為進行搭橋術(shù)后的長期隨訪研究提供了可能。

總之,顯微神經(jīng)外科技術(shù)是現(xiàn)代神經(jīng)外科領(lǐng)域的一項必備技術(shù),而實驗室的顯微技術(shù)訓(xùn)練必不可少。對初學(xué)者來講,大鼠頸總動脈端端吻合相對簡單,方法易掌握,且血管吻合通暢率較高,術(shù)后次日存活率高,可以作為一種顯微神經(jīng)外科技術(shù)培訓(xùn)的首選方式而推廣。免損傷頸總動脈周圍交感神經(jīng)叢、迷走神經(jīng)及周圍小血管,血管下放置膠皮墊片,血管阻斷夾夾閉頸總動脈兩端,顯微剪刀間斷頸總動脈,亞甲藍染色血管端端,肝素鹽水沖洗血管斷端殘腔,將兩側(cè)血管斷端向中間牽拉至無張力后,血管模型制作完成。

(3)血管端端吻合

右手持顯微彎鑷夾持11-0顯微縫針,采用“兩點定位法”,在血管兩側(cè)180°(即3點和9點)處分別縫合1針??p合時,先自血管近端外壁垂直血管壁進針,由血管遠端內(nèi)壁垂直血管壁穿出,緣距約為縫針自身厚度的2倍,縫合完畢后打3個結(jié)固定、剪線。采用同樣的方法,分別于血管表面及背面縫合2-3針,盡可能使針距相等??p合完成后,仔細查看吻合口,如有凸起、漏洞、內(nèi)翻明顯,則重新修理縫合。如整齊等距,則吻合完成,總共縫合約6-8針。首先松開血管遠端阻斷夾,若遠端充盈良好,若無明顯滲血,則松開血管近端阻斷夾,若輕微滲血,則用棉球輕壓即可,若干滲血明顯,則需檢查是否需要補針,直至血管通暢,切勿滲血為止。盡量不用棉球用力壓迫血管,防止血栓形成。

(參考文獻略)


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